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蛋白激酶抑制剂的鉴定Kinase RR试剂盒或激酶反应速率试剂盒是为了简单可靠的识别而开发的来自大型化合物库的蛋白激酶抑制剂候选物的离子。激酶 RR 试剂盒使用 ATP 降解率的直接生物发光测量来区分命中与非命中。与其他基于生物发光 ATP 的激酶测定相比,作用于荧光素酶的抑制剂不会产生干扰。此外,标准曲线是线性的而不是S形的。激酶 RR 试剂盒非常灵活,可以轻松适应各种 HTS 策略。据报道,Z’值高达 0.96。该测定不需要放射性材料、抗体或任何形式的缀合物。
类别:试剂盒SKU:111-021描述描述应用激酶 RR 试剂盒基于通过以下方式测量蛋白激酶反应的一级反应速率常数的方法:使用生物发光监测 ATP 降解率。该测定首先将 ATP 添加到含有所有必需测定成分(包括荧光素酶和荧光素)的反应混合物中。在 HTS 中,光在 t 处测量wo 时间点。在非高温超导中,可以重复测量光,直到光显着减少。该测定的设置使得 a) 激酶反应遵循一级动力学 b) 相对于空白(无激酶)标准化的样品光发射与剩余 ATP 浓度成正比。激酶反应的一级速率常数与几个数量级的激酶活性成正比,这使得建立新的测定变得非常容易。此外,ATP 和荧光素酶的变化在计算中相互抵消,不会影响测定结果。
仪器建议使用带有分配器的微孔板发光计来添加 ATP。然而,可以使用不带分配器的微孔板发光计。在这种情况下,请咨询 BioThema AB 以获得技术支持。
检测程序标准曲线生成、底物优化、HTS 和 IC50 测定的详细描述程序可在\"使用说明”中找到,每个试剂盒中都包含该信息。
参考文献Lundin, A. 和 Eriksson, J.,Assay and Drug Development Technologies,第 6 卷,第 3 期,2008 年(正在印刷中)
产品特性推荐配件Kinase RR 工具箱 (Microsoft Excel) 可用于计算和显示结果。其中包括有关光度计设置的详细说明、以下应用的数据收集和分析说明:底物优化 化合物库的标准曲线 HTS 测定 IC50 测定
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